抗独特型抗体服务永生化细胞系构建
1.什么是细胞永生化抗独特型抗体服务细胞永生化是指细胞在体外培养的过程中，由于自身基因变化或者是外界各种刺激条件，避免的正常传代细胞衰老死亡的过程，以至于可以长期传代培养、无限分裂增殖。
2.细胞永生化的意义
（1）能获得大量的细胞资源，改善细胞传代少、增殖慢的困境，使细胞可以无限传代，并且永生化的细胞生长更强劲，节省了实验周期；
（2）可以帮助研究者熟悉掌握细胞增殖与衰老死亡的的生理过程；
（3）是体外研究肿瘤细胞各个阶段的的良好模型，为癌症治疗、抑制癌症细胞增殖等提供新的研究方向；
（4）在遗传上属于同一种群，能够建立相同遗传性状的细胞库，有助于实验结果的稳定性。
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3.细胞永生化的方法
细胞永生化一般有两种分子机制：外源病毒蛋白抑制或者自身突变导致原癌基因活化或抑癌基因失活，使细胞绕过正常细胞的周期检查点，细胞衰老死亡途径受阻，达到无限增殖的目的;另一种是激活端粒酶使端粒长度延长，可以持续增殖；具有致瘤性的病毒如SV40病毒、EB病毒、人乳头状瘤病毒HPV等。
细胞永生化有不同的方法，不同的方法适用于不同的组织细胞。如HPV可介导人的上皮细胞如口腔上皮细胞、表皮细胞、角化上皮等的上皮细胞永生化；猿猴病毒的SV40 大T抗原（TAg）用于黏附细胞、成纤维细胞、内皮细胞等、EBV用于淋巴母细胞样细胞；端粒酶TERT则用于间充质干细胞和其他一些细胞。
3.1端粒酶TERT
端粒（Telomere）是一种真核细胞染色体末端DNA-蛋白复合体的特殊结构。端粒有重要的生物学功能，可保护染色体末端的正常结构，免于退化和消亡，因此在染色体正常复制、细胞凋亡和细胞转化等方面发挥重大作用。端粒酶可以合成新的端粒，从而延长端粒的长度，通常情况下，端粒酶表达量较低，但在病毒介导hTERT下，端粒酶可以正常表达，从而增长细胞的生命周期。
3.2 SV40的T抗原
SV40是真核细胞病毒，SV40的T抗原（TAg）通过与肿瘤细胞内抑制因子Rb和p53结合并抑制其功能而起作用。
3.3原癌基因
研究表明，原癌基因可以激活端粒酶的活性，因此激活Myc, c-Jun, c-Ias, vsrc、Mdm2、RAS、c-fos、Bmi1、CDK4等原癌基因可以促进细胞永生化的进程。
3.4抑癌基因
使抑癌基因p53, pRb, BRCA1, DPC4等失活，同样可以激活端粒酶，使细胞得到永生化。
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