浅谈细胞培养中的超纯水

　　细胞培养用水的污染来源有很多种，比如细菌、酵母或霉菌等。这些污染物通常肉眼可见，或者在光学显微镜下可见。然而，化学来源的污染物或其它生物媒介也可能会影响所培养细胞的生长、形态学或细胞行为，但是它们无法用裸眼检测到。因此细胞培养的用水必须不含微生物，尤其是内毒素、无机离子(重金属，如铅、锌等)，或有机复合物(腐殖酸，单宁酸，杀虫剂等)。如需了解更多信息，请参阅参考文献[1,2]。自来水(龙头水)中典型的杂质和用于细胞培养的目标值如表1所示。

　　本实验的目的是为了评估Arium pro UF系统生产的超纯水是否能够安全无恙地轻松用于细胞培养应用。在本研究中，我们以即用型CDM4PERMab(Hyclone)培养基来培养PER.C6 EpCAM细胞作为对照，同时分别用Arium pro UF生产出来的水(UF水)和RO水来配制CDM4PERMab(Hyclone)粉末培养基。在本应用指南中所使用的RO水数据是通过新一代Arium高级系统的旧款模型(Arium RO)而获得的。每个培养批次的结果用于评估由Arium pro UF系统生产的水是否适合用于PER.C6 EpCAM细胞的培养。

　　单克隆抗体生产本实验中所使用的PER.C6细胞系来源于人成视网膜细胞，如今也应用于重组蛋白的表达和单克隆抗体(Mab生产)的制备，以及用于治疗性蛋白和单克隆抗体的生产。

　　结论

　　本实验结果清楚地显示了用UF水配制的粉末培养基(CDM4PERMab培养基)比市场上在售的即用型培养基更加适合PER.C6 EpCAM细胞系的培养。PER.C6 EpCAM细胞系在用UF水配制的培养基中培养后的生长特征与对照组中用即用型CDM4PERMab培养基培养后的特征相似。 此外，我们还观察到当实验在Spinner Flasks中进行时，细胞系样品在用UF水配制的培养基中培养与用RO水配制的培养基中培养相比，细胞生长更加良好。在这项实验中，细胞密度基本都变得很高，而O2不再是限制性因素。因此我们得出结论，RO水中因为有更高浓度的内毒素或无机盐，因此影响了细胞生长。

　　这些实验结果都通过在Spinner Flasks中培养PER.C6 EpCAM细胞系而获得的单抗产量得到进一步验证与体现。PER.C6 EpCAM细胞系在用Arium pro UF超纯水配制的培养基样品中培养能够获得最高的单抗产量，对照组(使用即用型培养基)的产量稍低。这两种情况的单抗产量都不同于RO水样品，在RO水样品中培养后单抗产量反而下降。