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生物药分析公司荧光原位杂交技术鉴定单克隆源性

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发表于 2024-2-20 11:23:36 | 查看全部 阅读模式

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 利用荧光原位杂交技术来检测细胞是否来源单一,其结果可视化,具有说服力。
  荧光原位杂交技术是利用荧光检测系统对DNA进行定性、定量或相对定位分析的技术,其基本原理是根据DNA序列的互补性,用已知的荧光素、生物素或地高辛标记的核酸探针与待检测样本的DNA进行杂交,形成可检测的双链核酸杂交。
  5.荧光原位杂交技术优势
  荧光原位杂交法具有其他杂交方法没有的优势:
  (1)FISH是非放射性元素标记,更加安全;
  (2)FISH的实验周期短,可同时检测多种序列;
  (3)FISH技术因其多次免疫化学反应增强了杂交信号,灵敏度与放射性探针相当。
  6.生物能够为客户提供高质量的单克隆源性鉴定服务
  生物药分析公司生物(KMD Bioscience)多年来致力于细胞生物学技术研究,我们拥有经验丰富的科研专家团队、实验技能精湛的实验团队、完善的细胞培养平台以及完备的实验仪器和实验条件,搭建了完备的荧光原位杂交技术服务平台,积累了大量的成功经验。凭借扎实的专业技术,我们可以定制化提供从探针设计到细胞单克隆源性鉴定全套服务,力求以高效率、低成本效益的方式为客户解决问题。
  7.荧光原位杂服务交流程介绍
  生物可以提供荧光原位杂交服务,主要技术流程如下:探针设计与合成,样本处理,原位杂交实验,成像拍照,结果分析与项目报告。
  7.1探针设计和合成
  7.1.1即用型探针可以直接杂交,非即用型探针需要与与杂交液按 1:1:1:50 比例稀释,85℃变性 3 分钟,37℃平衡 5 分钟。
  7.2样本处理
  7.2.1脱蜡复水,将石蜡切片浸入二甲苯中脱蜡,2 次,每次 10 分钟;
  7.2.2片子依次过 100%、85%、75%乙醇,各 3 分钟,PBS 3 分钟;
  7.2.3 片子加胃蛋白酶消化液,37℃消化 15-30 分钟,PBS 洗涤 2 次,每次 3 分钟;
  7.2.4预杂交:提前 30 分钟从冰箱中取出杂交液恢复至室温,滴加杂交液,杂交仪中 55℃孵育 1 小时。
  7.3原位杂交实验
  7.3.1取出预杂交好的片子,去除多余液体,将探针滴加于片子上,完全覆盖组织, 放于杂交仪中 37℃杂交过夜;
  7.3.2片子入 2×SSC(0.1%NP-40)中洗涤 3 次,每次 5 min;
  7.3.3 滴加 20ul DAPI-Antifade Solution 盖玻片封片,避光孵育 20min。

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