设为首页
收藏本站
管理
物业交费
切换到宽版
首页
社区
数商
商圈
商城
优惠券
登录
立即注册
运城社区
»
社区
›
运城发布
›
洞见运城
›
FUT8 细胞系ELISA试剂盒是干什么用的,又该怎么用呢? ...
返回列表
发布新帖
FUT8 细胞系ELISA试剂盒是干什么用的,又该怎么用呢?
104
0
ningxueqin
Lv.5
发表于 2024-4-13 16:38:39
|
查看全部
阅读模式
马上注册,开启数字生活。
您需要
登录
才可以下载或查看,没有账号?
立即注册
×
FUT8 细胞系
ELISA试剂盒即酶联吸附试验,是一种常用的固相酶免疫测定方法。Engvall 和Perlmann于1971年应用该法进行了IgG定量测定,并命名为"enzyme linked immunosorbent assay (ELISA)"。
ELISA试剂盒免疫测定的目的:
1.测定体液中的各种蛋白质,包括含量极少的蛋白质如甲胎蛋白等;
2.测定激素,包括小分子量的甾体激素等;
3.测定抗生素和药物;
4.测定病原体抗原,HBsAg、HBeAg等;
5.利用纯化的抗原检测标本中的抗体,例如抗-HBs等;
ELISA的基本原理
①使抗原(或抗体)结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性;
②使抗原(或抗体)与某种酶联结成酶标 抗原(或抗体),而且此酶标抗原(或抗体)既保留其免疫活性,又保留其酶活性;
③测定时将受检标本(抗体或抗原)和酶标抗原(或 抗体)按不同步骤与固相载体表面的抗原或抗体进行反应,再用洗涤方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其它物质分开,后结合 在固相载体上的酶量与标本中受检的抗体或抗原量成一定比例;再加入酶反应底物后,底物被酶催化后变为有色产物,根据其颜色反应的 深浅进行定性或定量分析,以了解被测标本中抗体或抗原含量。
ELISA试剂盒实验方法被广泛应用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在中 除正常反应外,有时常可见到一些错误结果(即假阳性或假阴性结果)。引起ELISA测定错误结果的原因主要有:①标本因素;②试剂因素;③操作因素。本文就标本因素对ELISA测定的影响做如下讨论。
ELISA试剂盒实验步骤
1.包被;
2.加样:加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔);
3.加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小时,洗涤。
4.加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分钟;
5.终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml;
6.结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm处,以空白对照孔调零后测各孔OD值。
血清是ELISA标本,血浆一般可视为与血清同等的标本,标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致,分为内源性物质和外源性物质两种。
回复
使用道具
举报
提升卡
置顶卡
沉默卡
喧嚣卡
变色卡
千斤顶
显身卡
返回列表
发布新帖
回复
高级模式
B
Color
Image
Link
Quote
Code
Smilies
您需要登录后才可以回帖
登录
|
立即注册
本版积分规则
发表回复
回帖并转播
回帖后跳转到最后一页
ningxueqin
Lv.5
五星社员
主题
回帖
0
积分
76298
+ 关注
发消息
关于我们
关于我们
新闻动态
联系我们
服务支持
官方商城
售后服务
投诉/建议联系
18636392123
未经授权禁止转载,复制和建立镜像,
如有违反,追究法律责任
关注小程序
添加微信客服
Copyright © 2001-2024
运城社区
版权所有
All Rights Reserved.
|
网站地图
晋ICP备16004466号-2
关灯
在本版发帖
扫一扫添加微信客服
QQ客服
返回顶部
快速回复
返回顶部
返回列表